【摘要】目的观察中药复方红袍胃安通过正交设计法按方药组成君、臣、佐、使拆分出的部分组方对小鼠胃排空、肠推进的影响和对大鼠胃液分泌等指标的影响，评价出该复方拆方后的最有效的精简组方，为进一步研发打下基础。方法采用综合法造成大鼠慢性胃炎模型，大鼠幽门结扎法分析胃液，蛋清毛细管法，小鼠胃排空及肠推进等实验方法。结果造模动物经给药后，除方10（厚朴+马蹄香+甘草）外，胃液分泌量均显著降低；方3（延胡索+隔山消+陈皮+苍术）、方4（甘草）和方9（厚朴+马蹄香+延胡索+隔山消+陈皮+苍术）能显著降低胃液的总酸度，方2（厚朴+马蹄香）和方11（延胡索+隔山消+陈皮+苍术+甘草）降低胃液总酸度的作用次之；方5（全方）有增强的趋势，方7（大红袍+白术+延胡索+隔山消+陈皮+苍术）和方8（大红袍+白术+甘草）有降低胃蛋白酶活性的趋势；给药组方2（厚朴+马蹄香）、方5（全方）、方6（大红袍+白术+厚朴+马蹄香）的作用与香砂平胃组相当，能增强小鼠对酚红的排空率，方3，7，9，10，11能减慢小鼠的胃排空率；给药组方5、方6与香砂平胃阳性药组比，其作用相当，能显著促进小肠推进运动。结论综合以上实验结果得出，方6（大红袍+白术+厚朴+马蹄香）药效作用与全方最为接近。

本方经前期研究的实验结果表明：红袍胃安能增强胃肠运动，解除胃肠痉挛，显著抑制胃液分泌，降低胃液中总酸排出量，有增强胃蛋白酶活性的趋势[1]；还能显著增加胃壁粘液量和胃游离粘液量，而对胃粘膜血流量影响不明显[2]，但能延长小鼠凝血时间，显著增强小鼠的单核巨噬细胞吞噬功能，增加免疫器官重量及抗炎、镇痛、镇静等药理作用[3].为其具有健脾燥湿，行气止痛之功效提供了实验依据。但由于时间经费的限制，还存在服用量大，全方药味较多，不利于制剂及质量控制，不适宜大生产及进一步的研发，因此，拟进行进一步的拆方研究，分析筛选有效药物，精减处方以利于进一步的研发。现报道如下。

1材料与仪器

1.1药物均购自云南省药材公司。经鉴定为：大红袍为豆科杭子梢属植物毛杭子梢Campylotropishirtella（Fr.）Schindl.的根；隔山消为牻牛儿苗科植物紫地榆GeraniumstrictipesR.Kunth的根；马蹄香为败酱科植物心叶缬草ValerianajatamansiiJones的根茎。白术、苍术等其他药材均符合药典要求。

1.2动物SD大鼠，体重200～270g，雌雄兼用，动物合格证号：200604；KM小鼠，体重18～22g，雌雄兼用，动物合格证号：20060404，均由昆明医学院实验动物中心提供。

1.3试剂均为市售合格试剂。

1.4仪器TGL-20M台式高速冷冻离心机（长沙天创仪器制造有限公司）；PB-10型PH计（北京赛多利斯仪器系统有限公司）；UV-2450型分光光度计（日本岛津）；PL403型电子天平（上海梅特勒-托利多仪器有限公司）。

2方法

2.1拆方分析按照正交设计法及方药组成君、臣、佐、使拆方组成12个组〔L8（27）表一阶交互考虑，1/2实施比例〕，即：方1：君药（大红袍+白术）；方2：臣药（厚朴+马蹄香）；方3：佐药（延胡索+隔山消+陈皮+苍术）；方4：使药（甘草）；方5：全方（大红袍+白术+厚朴+马蹄香+延胡索+隔山消+陈皮苍术+甘草）；方6：君药+臣药（大红袍+白术+厚朴+马蹄香）；方7：君药+佐药（大红袍+白术+延胡索+隔山消+陈皮+苍术）；方8：君药+使药（大红袍+白术+甘草）；方9：臣药+佐药（厚朴+马蹄香+延胡索+隔山消+陈皮+苍术）；方10：臣药+使药（厚朴+马蹄香+甘草）；方11：佐药+使药（延胡索+隔山消+陈皮+苍术+甘草）；方12：空白对照组。

2.2分组及药液制备

2.2.1实验大鼠分组情况随机分为15组：即拆方的12个组、两个阳性药对照组（香砂平胃颗粒和雷尼替丁胶囊）和模型对照组。

2.2.2实验小鼠分组情况均随机分为13组：即拆方的12个组和阳性药对照组（香砂平胃颗粒）。

2.2.3给药剂量均为临床人用量的25倍（按公斤体重折算），灌胃给药，1次/d.

2.2.4药液制备按原处方剂量称取各组药材分别用冷水浸泡20min，煮沸后再煎煮30min，双层纱布过滤，药渣再加水煮沸20min，过滤，合并两次滤液，浓缩至所需的体积，置冰箱内4℃保存备用。

2.3统计学处理实验数据符合正态分布，方差齐者：用t检验；方差不齐者：用t′检验。实验数据如有偏态，则用参比差值法。数据均用SPSS12.0软件处理。

2.4慢性胃炎模型的制备[4]大鼠雌雄各半，随机分为15组，即正常对照组、模型对照组、各药物组，每组10只，每5只一笼，雌雄分笼喂养。第1个月每隔5d，第2个月每隔7d，经口灌服60%的乙醇溶液一次，每次每只2ml，其间以pH7.0～7.8、20mmol/L去氧胆酸钠溶液取代水随意饮用，第3个月分别用30%乙醇溶液及20mmol/L去氧胆酸钠溶液，每隔3d轮换1次随意饮用。

2.5对大鼠幽门结扎型胃液分泌的影响[5]按文献方法进行慢性胃炎模型造模3个月后，第4个月开始给大鼠灌胃给药，连续灌服30d，末次给药前禁食24h，禁食期间可自由饮水，于末次给药前在乌拉坦麻醉下施幽门结扎术。结扎好立即十二指肠给药，空白组给等体积的生理盐水，然后缝合腹壁切口，停止供食供水，结扎后6h处死大鼠，摘取胃并收集胃液于离心管，以3000r/min，离心15min，计算胃液量，取上清液作胃液分析（酸碱滴定法）。在胃内注入10ml10%福尔马林固定，用线扎紧食道，让胃充分展开，作病理切片检查。

胃液分析：①pH值测定：将胃液倒入1ml小烧杯中，用自动电位滴定计测定胃液的pH值，（对于胃液量少于1ml者用精密pH试纸测定pH值）；②胃酸测定：（酸碱中和滴定法）取胃液2ml置于小三角烧瓶中，加入酚酞2滴，用滴定管慢慢用0.02mol/LNaOH滴定，同时不断摇动，滴定至微红色不退为止，即为总酸度滴定终点，记录滴定耗NaOH毫升数。计算总酸度（μEq/L）=消耗NaOH总毫升数×10.结果见表1.表1对大鼠胃液分泌的影响与空白组比较，*P﹤0.05，**P﹤0.01；与模型对照组比较，◆P﹤0.05，◆◆P﹤0.01；与雷尼替丁组比较，△P﹤0.05，△△P﹤0.01；与香砂平胃组比较，★P﹤0.05，★★P﹤0.01；n=10

结果表明：实验动物经造成慢性胃炎的模型后，胃液总酸度和胃液分泌量显著降低（P<0.05），对胃液pH值影响不显著。造模动物经给药后，除方10外，胃液分泌量均显著降低；方3、方4和方9能极显著降低胃液的总酸度（P<0.01），方2和方11降低胃液总酸度的作用次之（P<0.05），其余各组均不显著。

2.6在体胃蛋白酶活性测定（mett氏改良法）[5]用定量吸血毛细管灌满蛋清（注意管内应无气泡）。然后放在85℃热水中使蛋白凝固，实验时取上述幽门结扎大鼠的胃液0.3ml放入10ml的试管中，加0.05mol/L的HCl溶液4.5ml摇匀，放进5cm长蛋白管两根，在37℃恒温水浴中孵育24h，取出蛋白管，测量蛋白管两端透明部分的长度（mm），以四端之值取平均值。胃蛋白酶活性单位=平均值2×16.经统计比较。结果见表2.表2对大鼠胃蛋白酶活性的影响。

结果表明：与模型对照组比较，对胃蛋白酶活性影响：实验动物经造成慢性胃炎的模型后影响不显著，方5有增强的趋势，方7和方8有降低胃蛋白酶活性的趋势。其余各给药组均不显著。（由于胃液量的限制，测定胃蛋白酶的例数较少，甚至有的组没有足够的胃液测定该指标，所以现做以简单说明，用t检验或tˊ检验的统计方法来说明药物作用的大体趋势）。

2.7对小鼠胃排空运动的影响[5]（比色法）取小鼠130只，雌雄均用，随机分为13组，分组及给药方法如前所述，连续灌胃给药7d，第6天开始禁食24h，末次给药为皮下注射，30min后灌服0.1%的酚红溶液0.2ml/只，20min后脱臼处死动物，剖腹摘取胃置于培养皿中，加入10ml蒸馏水，用小剪刀沿胃大弯剪开胃，将胃内容物充分洗于蒸馏水中，倒入试管，以2000r/min离心10min，取上清液4ml加2ml0.5mol/LNaOH显色，用UV-2450型分光光度计测其光密度（560nm）。以胃中酚红残留量（OD值）为指标，计算酚红排空率〔酚红排空率（%）=1-实验组OD值/零点对照OD值〕经统计比较。结果见表3.表3对小鼠胃酚红排空的影响与空白组比较，*P﹤0.05，**P﹤0.01；与香砂平胃组比较，★P﹤0.05，★★P﹤0.01

结果表明，与空白和香砂平胃组比较，给药组方2，方5，方6的作用与香砂平胃组相当，能增强小鼠对酚红的排空率。方1，方4和方8影响不明显，方3，7，9，10，11能减慢小鼠的胃排空率。

2.8对小鼠小肠推进率的影响[5]（炭末法）取小鼠130只，随机分为13组，分组及给药方法如表所述，连续灌胃给药7d，第6天开始禁食24h，于末次给药（各药中加入5%炭末作指示剂）15min后脱颈处死，立即剖腹分离肠系膜，剪取上至幽门，下至回盲部的肠管，轻轻理成直线，测量小肠全长及炭末推进的距离，用下列公式计算推进率：推进率（%）=炭末在小肠内距离/小肠总长×100%.结果见表4.

结果表明，与空白组比较，给药组除方2，方4外，能显著促进小肠推进运动。与香砂平胃组比较，给药组方5，方6与其作用相当。表4对小鼠小肠推进率的影响与空白组比较，*P﹤0.05，**P﹤0.01；与香砂平胃组比较，★P﹤0.05，★★P﹤0.01

3小结与讨论

综上所述，红袍胃安经过拆方后，方6（君药+臣药）能显著抑制胃液分泌，降低胃液中的总酸度，显著促进肠推进和胃排空的作用，但对胃蛋白酶活性影响不明显。

慢性胃炎多属脾胃虚寒，常表现为胃肠功能低下，消化不良等，临床镜检及病变程度多表现为胃液量少，局限性粘膜充血等。针对慢性胃炎的一些表现及本中药复方的功效，拟定了方剂药效学方面的几个指标，来考察红袍胃安经过拆方后最有效的药味组合。结果表明，拆方后的11个方中，方6（君药+臣药）与全方的功效相近：能显著抑制胃液分泌，降低胃液中的总酸度，显著促进肠推进和胃排空的作用，但对胃蛋白酶活性影响不明显。结合前期的研究结果，将进一步对方6进行作用机制的研究加以验证其有效性医学教。育网。搜集整理。 

【参考文献】

[1]毛晓健，毛小平，徐晶，等。红袍胃安的部分药效研究[J].中医药学刊，2004，5（2）：863.

[2]毛晓健，陈凌云，耿润贤。红袍胃安胶囊对胃液分泌及胃粘膜血流量影响的实验观察[A].全国高等中药教育研究会，成都中医药大学。首届全国临床中药学学术研讨会论文集[C].2004：200.

[3]毛小平，毛晓健，陈凌云，等。红袍胃安抗炎及对免疫的影响[A].全国高等中药教育研究会，成都中医药大学。首届全国临床中药学学术研讨会论文集[C].2004：200.

[4]陈奇。中药药理实验方法学[M].北京：人民卫生出版社，1993：857，859，334.

[5]王金萍，边佳明，方杰。连夏消痞胶囊药效学研究[J].中国实验方剂学杂志，2005，11（2）：51.